目前常用的诊断类试剂盒涉及到的核酸纯化用试剂盒一般都采用离心柱法或者磁珠法进行核酸纯化,在自动化平台上采用磁珠法较多,手工使用离心柱法较多。两种方法从原理上来说都是利用了高盐条件下核酸和二氧化硅表面结合在低盐下和二氧化硅表面分离的这样的一个机理将体系内的核酸与蛋白、多糖等其他杂质分离开来。因此不论哪种方法含有杂质的液相部分分离的是否彻底对定量的结果是有明显的影响的。
采用柱法去除杂质的过程中会需要经历反复的离心过程(常用离心条件为:8,000rpm~14,000rpm,1-15min,4 度 / 常温的选择与离心时间有关),离心的效果和最后核酸的得率密切相关。
此外,在采用过柱法进行核酸纯化时,在离心的过程中的生物安全也是一个必须要重视的问题。
你一定要了解的 Eppendorf 气密性转子,为什么必须是气密性转子气溶胶是由悬浮在空气中的液滴和 / 或固体颗粒组成的胶体系统,在世界上几乎无处不在,所以如何防止有害气溶胶的吸入至关重要。常见的实验室活动非常容易产生气溶胶,最重要的是有害的生物气溶胶。有许多记录在案的实验室获得性感染病例是由于吸入传染性气溶胶造成的,这些感染可能的严重程度取决于病原体,并对实验室中的每个人都构成健康危害。
在所有的日常实验室工作中,离心是气溶胶的一个来源,你必须采取适当的预防措施时,工作的传染性或有害物质。在离心过程中,气溶胶可能在高速旋转过程中逸出,例如,微生物没有在离心机中充分密封,旋转无盖样品或管泄漏或断裂。
离心过程中如何最大限度的避免有害气溶胶的吸入,除了考虑加载容器的容积、材质,转子以及荷载样品的吊篮在防止离心机外气溶胶的形成中起着重要的作用,选择具有预防措施的离心机,配合适当的个人防护设备才能将风险降到最低。